蘇木素染色液

蘇木素染色液染色后細(xì)胞核呈藍(lán)色。本染色液可以和免疫熒光染色或免疫組化染色配合使用。一方面可以在本蘇木素染色液染色后進(jìn)行免疫熒光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫組化染色后再進(jìn)行蘇木素復(fù)染。本染色液可以重復(fù)使用，直至認(rèn)為效果不佳時(shí)再換用新的染色液。一個(gè)包裝的本染色液至少可以染色200個(gè)樣品。

蘇木素染色液使用說(shuō)明：

1. 樣品處理

a) 對(duì)于石蠟切片：

二甲苯中脫蠟5-10分鐘。

換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘。

無(wú)水乙醇5分鐘。

90%乙醇2分鐘。

70%乙醇2分鐘。

蒸餾水2分鐘。

b) 對(duì)于冰凍切片：

蒸餾水2分鐘。

c) 對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞：

用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。

蒸餾水洗滌2分鐘。

換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘。

2. 蘇木素染色

對(duì)于上述處理好的樣品：蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。

浸自來(lái)水中沖洗去多余的染色液，約10分鐘。

蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘)。

95%乙醇5秒。

此時(shí)，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理。

注：如果用于免疫組化等染色后的復(fù)染，可以參考上述步驟在其它染色完成后直接進(jìn)行蘇木素染

色。

3. 脫水、透明、封片或進(jìn)行其它染色

a) 脫水、透明、封片：

95%乙醇脫水2分鐘。

換用新鮮的95%乙醇再脫水2分鐘。

二甲苯透明5分鐘。

換用新鮮的二甲苯，再透明5分鐘。

用中性樹(shù)膠或其它封片劑封片。

顯微鏡下觀察，細(xì)胞核呈藍(lán)色。

b) 進(jìn)行其它染色：

如果進(jìn)行免疫熒光染色，或進(jìn)行Hoechst等熒光染料的染色，在

蘇木素染色液染色后：

70％乙醇洗滌2次，每次2分鐘。

PBS或生理鹽水或TBS或TBST等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5分鐘。

然后就可以進(jìn)行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色了。

保存條件：

室溫避光保存，至少一年有效。

注意事項(xiàng)：

需自備4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脫水、透明和封片處理，還需自備二甲苯，中性樹(shù)膠或其它封片劑。如果樣品是石蠟切片，需自備90%乙醇，無(wú)水乙醇以及二甲苯。

染色液可以重復(fù)使用多次，認(rèn)為效果不佳時(shí)再更換新的染色液。

使用本試劑盒時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。

為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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